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Valutazioni relative ad un nuovo sistema di ultrafiltrazione
per la concentrazione di enterovirus e batteriofagi |
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M. Divizia, D. Donia, R. Gabrieli, V. Ruscio, A. Panà |
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Dip. di Sanità Pubblica, Facoltà di Medicina - Università di Tor
Vergata, Roma |
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Riassunto - E' stato valutato un nuovo sistema di ultrafiltrazione
a cartuccia identificato come Prep-Scale. Sono state utilizzate
membrane in polisulfione e cellulosa con taglio molecolare pari
a 100.000. Campioni da 1 a 10 litri di acqua declorata erano addizionati
con poliovirus-1 Sabin (105 TCID50/litro)
o batteriofagi: Colifagi, F-plus e B40-8, ciascuno alla concentrazione
di 104 UFP/litro. Il recupero del poliovirus
utilizzando condizioni standard (9-10psi in entrata, velocità
2, rapporto ritenuto/filtrato 1:4 - 1:6, era costantemente del
100%, in tutte le prove con l'eccezione del primo test (42%).
Diversamente il recupero dei colifagi somatici oscillava tra 2,6%
e 95,8%, l'F plus 11,1% e 100%, il B40-8 7,7% e 100%. Nelle prove
successive pretrattando la membrana con estratto di carne al 3%
pH 7.0, ed eluendo controcorrente con 10 ml di estratto di carne
al 3% pH 9.5, i recuperi dell'F-plus e del B40-8 si sono mantenuti
costanti e pari o superiori al 100%. Nel complesso il sistema
Prep-Scale presenta una maggiore affidabilità nei recuperi,
almeno per il poliovirus e per i fagi F-plus e B40-8 nelle condizioni
indicate, e una maggiore facilità di esecuzione rispetto agli
altri sistemi già commercializzati.
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| Summary
- It has been evalualed a new system of ultrafiltration with cartridge
identified as Prep-Scale. In these experiments, we used membranes
in polysulfone and cellulose with molecular cut-off of 100.000.
Samples of 1 to 10 liters of dechlorinated tap water had added with
poliovirus or bacteriophages: Coliphages, F-plus and B40-8. The
recovery oi the poliovirus (105 TCID50/lt), using standard conditions,
it was always 100% in all the tests with the exception of the first
one (42%). Otherwise the recovery of the coliphages was included
between 2,6% and 95,8%, the F-plus 11.1 % and 100%, the B40-8 7.7%
and 100%. In the last tests using a pretreatment with 3% of beef-extracrat
pH 7.0 and back-washing with 10 Ml of beef-extract at 3% pH 9.5,
the recoveries of the F-plus and B40-8 always were of the 100%.
In conclusion, the Prep-Scale system has presented a easier standardization,
at least for the poliovirus and F-plus and B40-8, and a better facility
of execution as regards the other commercialized systems. |
| Résumé
- On à mìs à point un nouveau sistème d'ultrafiltration à cartouche
appelé Prep- Scale. Les auteurs ont utilisé aussi bien des membranes
en polysulfone que de la cellulose avec coupage moléculaire de l'ordre
de 100.000. Les échantillons d'eau déchlorée (allant de un à dix
litres) ont été additionnés de Poliovirus-1 Sabin (105
TCID 50/lt) ou de bactériophages: coliphages, F-plus et B40-8, avec
une concentration de 104 UFP/lt. En utilisant
des conditions de normalité; la récuperation da poliovirus a eté
constamment de 100% au cors de toutes les éprevves, à ceci près
da premier test. Diffiéremment, la récuperation des coliphages somatiques
oscillait entre 2,6% et 95,8%; le F-plus entre 11,1% et 100%; le
B40-8 entre 7,7% et 100%. Dans les études qui suivaient, on a pu
garder les récuperations da F-plus et du B40-8 autor de 100%, tant
par le biais d'un pre-traitement de la membrane avec un extrait
de viande de 3% et un pH de 7,0, qu'à l'aide d'une élution contre-courant
avec 10 ml d'extrait de viande à 3%, le pH étant fixé a 9,5. En
général, on a pu constater que dans les conditions indiquées, le
Prep-Scale montre une plus grande fiabilité dans les récuperations,
au moins pour ce qui est da poliovirus et des phages F-plus et B40-8.
Par rapport à d'autres systèmes déjà lancés sur le marché, le Prep-Scale
montre en outre une plus grande facilité d'exécution. |
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Zusammenfassung - Ein neues System zur Ultrafiltrierung,
Prep-Scale genannt,wurde getestet. Dazu wurden Membranen aus Polysulfon
und Zellulose mit eineni molekularen cut-off von 100.000 benützt.
Proben von 1 bis 10 Liter entchlortem Wasser wurden mit Poliovirus-1
Sabin (105 TCID50/Liter) oder mit ßakteriofagen:
Kolifagen, F-plus und B40-8, jeweils auf 104 UFP/Liter konzentriert.
Bei Standardkonditionen wurde der Poliovirus konstant zu 100% in
allen Proben wiedergefunden, außer beim ersten Test (42%). Anderseits
schwankte der Fund der Kolifagen zwischen 2,6% und 95,8%, F-Plus
11,1% und 100%, B40-8 7,7% und 100%. In den darauffolgenden Experimenten
wurden die Membranen mit 3% Fleischextract bei 9,5 pH vorbehandelt
und dann umgekehrt mit 10 ml 3% Fleischextract bei 9,5 pH ausgewaschen.
Daraufhin blieben die Werte des F-plus und des B40-8 konstant bei
100%. Im Großen und Ganzen weist das Prep-Scale System eine größere
Sicherheit im Wiederfund, jedenfalls von Poliovirus und den Fagen
F-plus und B40-8, bei den besprochenen Bedingungen auf und eine
einfachere Behandungsart gegenüber andlere Produkten. |
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